臭氧對小鼠肺癌細(xì)胞的毒性作用研究

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模貉芯坎煌瑵舛瘸粞鯇π∈蠓伟┘?xì)胞的毒性作用及其機(jī)制。

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：

細(xì)胞培養(yǎng)：培養(yǎng)小鼠肺癌細(xì)胞系 LLC，用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基，在 37℃、5% CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

臭氧暴露：將對數(shù)生長期的 LLC 細(xì)胞暴露于不同濃度的臭氧氣體（0、0.1、0.5、1.0 ppm）中，暴露時(shí)間為 2 小時(shí)，北京同林科技臭氧發(fā)生器UV-M2。

檢測指標(biāo)：

細(xì)胞活力：采用 MTT 法檢測臭氧處理后 24、48 和 72 小時(shí)的細(xì)胞活力。

細(xì)胞凋亡：采用 Annexin V-FITC/PI 雙染法檢測細(xì)胞凋亡率。

氧化應(yīng)激指標(biāo)：檢測細(xì)胞內(nèi) ROS 水平、MDA 含量和 GSH 含量。

線粒體功能：檢測線粒體膜電位和 ATP 含量。

信號通路蛋白：采用 Western blot 檢測 p38MAPK、JNK、ERK 和 NF-κB 等信號通路蛋白的表達(dá)和磷酸化水平。

數(shù)據(jù)分析：采用單因素方差分析（ANOVA）比較不同臭氧濃度組之間的差異，P<0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

預(yù)期結(jié)果：臭氧處理可導(dǎo)致 LLC 細(xì)胞活力下降，凋亡率增加，ROS 水平和 MDA 含量升高，GSH 含量和 ATP 含量降低，線粒體膜電位下降，p38MAPK、JNK 和 NF-κB 信號通路激活。